Porovnání výsledků základního koagulačního vyšetření provedeného ve třech různých laboratořích ze stejného vzorku krve

Alena FÁLOVÁ

Bachelor's thesis

Comparison of the results of basic coagulation tests carried out in three different laboratories on the same sample of blood

Abstract:

Základní koagulační vyšetření se provádí v každé hematologické laboratoři. Tato vyšetření by se měla provádět všem pacientům, kteří mají podstoupit operační zákrok a pacientům léčeným antikoagulanty. Koagulační vyšetření umožňují zjistit, zda se jedná o poruchu vnější či vnitřní cesty koagulační kaskády. Konečná diagnóza se stanoví speciálními testy. K základním koagulačním vyšetřením patří protrombinový čas, aktivovaný parciální tromboplastinový čas a fibrinogen. Principem koagulačních metod je určení času potřebného k detekci fibrinového vlákna od přidání reagencie ke vzorku testované plazmy. Testy používané v hemostáze lze rozdělit na globální, skupinové a specifické. Na vyšetření se používají zkumavky s antikoagulačním činidlem, v případě hemostázy se jedná o citrát sodný. Při každém vyšetření je nutné dodržet správný poměr krve a citrátu ve zkumavce, neboť při jeho nedodržení nelze vyšetření provést. Velmi důležitá je také preanalytická část, jež obsahuje soubor postupů a činností, kterými projde vzorek od odběru po jeho zpracování, díky čemuž lze získat reprodukovatelné výsledky. V současné době se koagulační vyšetření provádějí v laboratořích na multifunkčních analyzátorech. K tomuto vyšetření se standartně používá venózní krev. U novějších, přenosných koagulometrů, na kterých se měří protrombinový čas u pacientů léčených antikoagulanty, však stačí pouze odběr krve z prstu. Tato práce je zaměřena na porovnání měření jednoho vzorku na třech různých koagulometrech, ve třech různých laboratořích. Pro každý analyzátor byly použity různé, výrobcem doporučené tromboplastiny s různým ISI (International sensitivity index - mezinárodní index citlivosti). Reagencie na aktivovaný parciální tromboplastinový čas byly ze stejných důvodů taktéž od různých výrobců. Bylo změřeno 50 náhodně vybraných vzorků, neboť ne každá žádanka má uvedený údaj s diagnózou pacienta. Každý vzorek jsem změřila týž den, do 4 hodin po odběru, aby byly dodrženy zásady správné laboratorní praxe. Vzorky byly svozovou službou svezeny do laboratoře Synlab czech s.r.o., kde byly také primárně změřeny na koagulometru Sysmex CA 1500. Další měření jsem provedla v laboratoři Stafila s. r.o. na koagulometru ACL Elite PRO a poslední měření v laboratoři Medipont s.r.o. na koagulometru START 4. Všechna měření byla statisticky vyhodnocena. Byly vypočteny průměrné hodnoty a směrodatné odchylky, které ukazují, že se výsledky od sebe příliš neliší. Dosažená hladina významnosti u INR (international normalised ratio ? mezinárodní normalizovaný poměr) a aktivovaného parciálního tromboplastinového času byla zhodnocena jako statisticky významná, což znamená, že se jednotlivé výsledky z daných koagulometrů liší. I když jsou odchylky mezi různými přístroji statisticky významné, nemají větší klinický význam. Pouze u protrombinového času v sekundách z měření vyplývá, že se výsledky z koagulometrů od sebe neliší. Totéž platí pří hodnocení koagulometrů mezi sebou. Lze konstatovat, že změřené výsledky jsou na různých přístrojích statisticky rozdílné, nicméně nemají větší klinický význam. Z daných zjištění plyne, že doporučení pro lékaře je, aby pro vyšetřování protrombinového času a aktivovaného parciálního tromboplastinového času využívali stále stejnou laboratoř. ?

Abstract:

Basic coagulation tests are carried out in every laboratory of hematology. Every patient who is about to undergo a surgery, or is treated with anticoagulants, should be examined this way. Coagulation tests allows to find out, if the patient is suffering from outer or from inner coagulation cascade disorder. Final diagnosis is carried out using specialized tests. The basic tests include protrombin time, activated parcial tromboplastin time, and fibrinogene. The principle of coagulation tests is determination of the time needed for detection of fibrin fiber after addition of reagent to the sample of tested plasma. Tests used in hemostasis can be global, group and specific. For the test, test tubes with an antikoagulant are used. In hemostasis, the antikoagulant used is trisodium citrate. It is always necessary to keep the same blood/citrate ratio. The preanalytical part, which consists of specific actions the sample undergoes from its obtaining to the analysis itself, is also very important. Nowadays, the coagulation tests are run in laboratories using multifunctional analysators. Blood samples are obtained from a vein. Small, portable coagulometers are used for measuring protrombin time for patients treated with anticoagulants. Blood for this test can be obtained from the fingertip. This thesis is focused on comparing the measurment of a sample on three different coagulometers. Different tromboplastins with different ISI (International Sensitivity Index) were used. Reagents for activated parcial tromboplastin time were also purchased from different producers. In this bachelor thesis, fifty randomly chosen samples were tested, because not every application form has the patients diagnosis stated. Every sample was tested that very day, within four hours from taking the blood. Samples were primarily tested in laboratory Synlab czech s.r.o., using coagulometer Sysmex CA. Other measurments were carried out in laboratory Stafila s.r.o. using coaguometer ACL Elite PRO and in laboratory Medipont s.r.o. using coagulometer START 4. All measurments were statisticaly evaluated. Average values and standard deviation were calculated, and shows, that the values does not differ significantly. Level of significance in INR test (international normalised ratio) and in activated parcial tromboplastin time was evaluated as statisticaly significant, yet without bigger clinical importance. Only in protrombine time, measured in seconds, results from coagulometers does not differ. The same can be applied when comparing coagulometers with each other. Based on my findings, it is recomended for the doctors to use the same laboratory for testing the protrombin time and activated parcial tromboplastin time. At the same time, it is necessary to say, that the differences measured in this thesis are so minor, that they have no practical clinical importance.

Keywords

Koagulační analyzátory, Protrombinový čas, PT, Hemostáza, Aktivovaný parciální tromboplastinový čas, aPTT, ISI mezinárodní index citlivosti, INR mezinárodní normalizovaný poměr

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 14. 8. 2013

Accessible from:: 14. 8. 2013

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Karel Blažek, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant