Vliv fenofibrátu a silymarinu na vybrané enzymy v tkáních potkaního modelu SHR-CRP

Bc. Jan SOUKOP

Master's thesis

Effect of fenofibrate and silymarin on selected enzymes in tissues of the SHR-CRP rat model

Abstract:

Cytochromy P450 (CYP) jsou klíčovými enzymy reakcí první fáze biotransformace xenobiotik, pomocí kterých jsou zprostředkovávány transformační reakce široké škály cizorodých látek. Produkty reakcí první fáze mají hydrofilnější charakter a mohou podstupovat dalším procesům. P-glykoprotein (P-gp) je nespecifický transportérový protein, který se podílí na exkreci mnoha léčiv a tím ovlivňuje řadu farmakokinetických dějů. Nadexprese P-gp může způsobovat tzv. mnohočetnou lékovou rezistenci, nedostatek tohoto proteinu naopak zapříčiňuje kumulaci toxických látek v tkáních, což se může projevit až fatálními následky. V rámci této diplomové práce byl studován vliv fenofibrátu, silymarinu a kombinace těchto látek na expresi genů Abcb1a1, Abcb1a2, Cyp1a1, Cyp3a23 a Nr1i2 v tkáních laboratorního potkana SHR-CRP pomocí metody RT-PCR. Na úrovni množství proteinu byly ve stejných tkáních stanovovány proteiny CYP1A1, CYP3A a P-gp. Výsledky ukazují statisticky významné zvýšení exprese Abcb1a u skupiny ošetřené silymarinem. Signifikantní snížení exprese Abcb1a i Abcb1b proběhlo ve skupině ošetřené fenofibrátem v játrech. Fenofibrát rovněž signifikantně downreguloval expresi Cyp3a23 a bez statistické významnosti snížil i Cyp1a1.

Abstract:

Cytochromes P450 (CYP) are essential enzymes in the first phase of metabolism, as CYPs mediate diverse transformational reactions for many xenobiotics. Products of the first biotransformational reactions have more hydrophilic character and are able to undergo further biotransformation reactions. P-glycoprotein (P-gp) is a transport protein participating in drug excretion and affecting pharmacokinetics. Overexpressed P-gp can cause Multi-drug resistance, on the contrary, low expression of P-gp may cause cumulation of toxic substances. In this diploma thesis, Fenofibrate, Silymarin and combination of these substances and their effect on Abcb1a, Abcb1b, Cyp1a1, Cyp3a23 and Nr1i2 genes in liver and kidney tissue was studied using RT-PCR method. Furthermore, effect of these substances on amount of ABCB1, CYP1A1 and CYP3A proteins in the same tissues was studied using Western blot method. Results show significant Abcb1a up-regulation in Silymarin treated group, on the contrary, fenofibrate caused significant downregulation of Abcb1a and Abcb1b in liver. Fenofibrate also significantly down-regulated Cyp3a23 and nonsignificantly down-regulated Cyp1a1.

Keywords

Fenofibrát, silymarin, stanovení genové exprese, stanovení množství proteinu, Western blot, RT-PCR

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 9. 8. 2021

Thesis defence

• Supervisor: PharmDr. Martin Poruba

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Experimental Biology of Plants